1. 報(bào)告結(jié)果中提示的多等位基因結(jié)果是什么？

答：正常的人源細(xì)胞組織細(xì)胞其STR圖譜，一個基因位點(diǎn)僅出現(xiàn)一個或2個峰。如發(fā)生細(xì)胞交叉污染現(xiàn)象，基因位點(diǎn)會出現(xiàn)多等位基因，即一個基因位點(diǎn)出現(xiàn)3個或以上峰?？紤]到微衛(wèi)星的不穩(wěn)定，也不排除細(xì)胞突變的情況。

2. 細(xì)胞匹配的判讀標(biāo)準(zhǔn)是什么，怎么通過結(jié)果大致分析是否存在交叉污染？

答：參考ATCC-ANSI細(xì)胞鑒定標(biāo)準(zhǔn)，檢測細(xì)胞和已公布的數(shù)據(jù)比對，匹配度低于0.8則判定細(xì)胞和目標(biāo)細(xì)胞系不匹配。匹配度在0.8-1.0之間，判定細(xì)胞基本匹配，可能存在交叉污染或者傳代代次過高導(dǎo)致的細(xì)胞質(zhì)量下滑，位點(diǎn)突變的情況。

需注意，當(dāng)出現(xiàn)3個及以上多等位基因結(jié)果時，需進(jìn)一步參考數(shù)據(jù)庫排查是否存在 叉污染。匹配度為1.0則樣本和目標(biāo)細(xì)胞絕對匹配，且細(xì)胞質(zhì)量較好。

3. 目前小鼠細(xì)胞的STR鑒定是否可以做？

答：目前除部分公布的小鼠細(xì)胞位點(diǎn)數(shù)據(jù)外，還采取自行收錄標(biāo)準(zhǔn)樣本的方式整合小鼠細(xì)胞數(shù)據(jù)庫，市面上常見的小鼠細(xì)胞系結(jié)果均可進(jìn)行鑒定。部分少見細(xì)胞系，需要通過定向數(shù)據(jù)比對的方式來確定來源。

4. 什么是 STR？細(xì)胞系鑒定原理簡單描述？STR 檢測結(jié)果里邊的數(shù)字是什么意思？

 答：STR:基因上的短串聯(lián)重復(fù)序列分子標(biāo)記（ATATATATATATAT，數(shù)字代表段串聯(lián)序列重復(fù)次數(shù)）。每一株構(gòu)建的細(xì)胞系都有一組特異性的 STR 數(shù)據(jù)與之對應(yīng)，細(xì)胞系是否正確，檢測該樣本的 STR 與數(shù)據(jù)庫對應(yīng)的細(xì)胞系 STR 比對是否一致即可。一旦細(xì)胞系的遺傳特性被確立，細(xì)胞系就應(yīng)該定期的檢測，以防止出現(xiàn)細(xì)胞系被誤認(rèn)或交叉污染的情況。

5. 什么時候需細(xì)胞系鑒定？

1、發(fā)表文章或申請課題經(jīng)費(fèi)前；

2、使用細(xì)胞進(jìn)行臨床治療（試驗(yàn)）前；

3、準(zhǔn)備凍存保種或已凍存多年的細(xì)胞；

4、一個涉及到細(xì)胞試驗(yàn)項(xiàng)目開始/結(jié)束時；

5、新得到的細(xì)胞或?qū)嶒?yàn)室培養(yǎng) 5 代以上的細(xì)胞；

6、細(xì)胞系表現(xiàn)不穩(wěn)定或結(jié)果與預(yù)期差別較大；細(xì)胞功能不正常；

7，實(shí)驗(yàn)室新建立的細(xì)胞系；

6 ，所鑒定的細(xì)胞系數(shù)據(jù)庫沒有 STR 數(shù)據(jù)參考怎么辦？為什么會無匹配？原代細(xì)胞能夠做細(xì)胞鑒定嗎?

答：出現(xiàn)匹配不上任何已知數(shù)據(jù)情況，是因?yàn)檫@株細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)序列并沒有收錄在國際的細(xì)胞庫之中，導(dǎo)致送檢樣本與任何的序列都不匹，或者樣本是自主構(gòu)建的新細(xì)胞系。沒有對比數(shù)據(jù)的，按說也要檢測一下 STR，只要做出來 str 數(shù)據(jù)跟數(shù)據(jù)庫排查，如果最后無匹配結(jié)果，問題不大，如果跟其他細(xì)胞匹配上 比如跟 hela 匹配上就有問題。原代細(xì)胞亦可做細(xì)胞系 STR 鑒定，一方面將其 STR 與數(shù)據(jù)庫做個排查。原代細(xì)胞鑒定需客戶提供原始組織和原代細(xì)胞，成組檢測，以原始組織的 STR 分型結(jié)果作為標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)進(jìn)行比對。

7. 細(xì)胞鑒定已公布的數(shù)據(jù)來源？

答：DSMZ 數(shù)據(jù)庫，是整合4個國際數(shù)據(jù)庫：美國ATCC、德國DSMZ、日本JCRB和RIKEN，Expasy數(shù)據(jù)庫輔助判斷。

8. 細(xì)胞鑒定STR體系涵蓋多少個位點(diǎn)？

答：國際金標(biāo)準(zhǔn)8個STR和1個性別鑒定位點(diǎn)，更額外贈送12個STR位點(diǎn)輔助判斷。

9. 細(xì)胞鑒定STR體系是否能應(yīng)用于干細(xì)胞存儲領(lǐng)域？

答：細(xì)胞鑒定是一種司法親子鑒定技術(shù)，不僅可以鑒定商品化的細(xì)胞株，還能應(yīng)用于干細(xì)胞來源性輔助鑒定。入庫細(xì)胞和對應(yīng)干細(xì)胞存儲者來源是否一致，也可通過細(xì)胞鑒定來實(shí)現(xiàn)。

10. 細(xì)胞鑒定STR能否分辨轉(zhuǎn)染細(xì)胞株的成功率和挑選轉(zhuǎn)染細(xì)胞株？

答：目前測試下來，轉(zhuǎn)染和基因改造的細(xì)胞系，STR結(jié)果基本一致，匹配度大概在0.9-1.0之間，僅通過STR的方法還是沒辦法做篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的目的，建議是通過WB和基金測序，單克隆挑選來篩選想要的穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株。